INTRODUÇÃO

O coronavírus 2019 (COVID-19) é uma doença respiratória causada pelo coronavírus respiratório agudo grave 2 (SARS-CoV-2). É capaz de causar um distúrbio multissistêmico complexo em pacientes¹ e é induzida por processos inflamatórios^{2 , 3} . Estudos têm demonstrado que a liberação descontrolada de citocinas pró-inflamatórias desencadeada por respostas imunológicas exacerbadas está diretamente relacionada à agressividade da doença^{2 - 4} . No entanto, o padrão de resposta imunológica humoral e a cinética de anticorpos em pacientes e suas implicações na memória imunológica não foram totalmente elucidados. Embora as complicações causadas pelo COVID-19 tenham levado a mais de 6,5 milhões de mortes em todo o mundo, de acordo com o painel da OMS, e mais de 657 milhões de casos confirmados, a maioria das pessoas infectadas tende a ter uma apresentação leve a moderada, onde aproximadamente 40% são leves e 40% moderados³ . Esses pacientes não precisam de internação ou cuidados intensivos⁵ .

Além disso, estudos recentes têm investigado se os sintomas persistentes indicam sequelas que poderiam estar relacionadas à função pulmonar ou outras alterações sistêmicas⁶ . Exemplos disso incluem COVID de longa duração, considerado quando sintomas são persistentes por semanas ou meses; condições pós-COVID-19, conhecidas como qualquer problema de saúde recorrente, novo ou persistente apresentado após mais de quatro semanas após a doença COVID-19⁷ ; e a implicação dessas condições na vacinação são novas preocupações relacionadas ao COVID-19 em todo o mundo. Acreditamos que as observações de apresentações sintomáticas leves ajudam a obter conhecimento do resultado natural da doença (8), proporcionando aplicabilidade clínica a curto prazo e contribuindo para a compreensão a longo prazo do tratamento e prevenção de cenários mais graves.

A COVID-19 é uma doença multissistêmica complexa e ainda não é bem conhecido se os sintomas na fase aguda se correlacionam com a duração da resposta imune e a persistência dos sintomas crônicos. Portanto, este estudo teve como objetivo avaliar e monitorar os sintomas clínicos de uma coorte de trabalhadores da saúde durante seis meses e correlacioná-los com a produção de anticorpos neutralizantes.

MÉTODO

RESULTADOS

Inicialmente, um total de 73 indivíduos foram incluídos, no entanto, quatro foram excluídos devido a uma nova infecção por SARS-CoV-2 portanto, 69 pacientes participaram na análise final. Todos os pacientes apresentaram sintomas leves a moderados. A média de idade da coorte de pacientes foi de 40 (±10) anos e era predominantemente do sexo feminino (74%; N=54). Dos 69 pacientes, 55 (78,77%) tinham histórico médico de comorbidades: 9 (12,3%) eram hipertensos, 2 (2,7%) tinham diabetes tipo 2, 25 (36,23%) tinham pré-obesidade e 19 (27,54% ) tinha obesidade. Verificou-se que 21,74% dos pacientes faziam uso de pelo menos um medicamento para doença crônica, 17,7% eram tabagistas, 49 (71,01%) consumiam bebidas alcoólicas e 30 (43,48%) praticavam exercícios físicos. Mais detalhes sobre os dados demográficos dos pacientes são apresentados na Tabela 1 . O número médio de sintomas que os pacientes apresentaram na fase aguda foi de 5,1 (±2,3). Os sintomas mais comuns nessa fase foram dores musculares, cefaléia, anosmia e ageusia. No 30º dia, os principais sintomas relatados foram fadiga, expressa como astenia (18%), adinamia (14%), anosmia (18%), ageusia (7%) e dores musculares (7%).

A função pulmonar de 54 pacientes foi avaliada por espirometria (15 não realizaram a prova de função pulmonar por diagnóstico prévio de doença respiratória). A maioria desses pacientes eram mulheres (43/54; 79,6%), com idade média de 39,7 (±10,1) anos. Dentre os pacientes avaliados, cinco (9,25%) apresentavam padrão obstrutivo leve com VEF1/CVF abaixo do valor de referência e VEF1 > 60%. Nenhum dos pacientes apresentou padrão restritivo. Três pacientes apresentaram sintomas respiratórios prolongados e foram medicados com beclometasona (400 µg, 12/12h) ou salbutamol (100 µg, medicação de resgate). Na segunda avaliação pulmonar (após 180 dias), todos os pacientes estavam assintomáticos e com função pulmonar normal segundo os parâmetros espirométricos (VEF1 e VEF1/CVF). Todas as medicações já foram suspensas após esta fase. O teste de Kolmogorov-Smirnov apresentou distribuição não normal em todos os períodos de observação para IgG e IgM, portanto a técnica não paramétrica foi aplicada para esses dados. Houve diferença significativa nas medianas dos níveis de IgG e IgM em todas as avaliações (p < 0,001).

A curva sorológica de IgG apresentou mediana de pico no 30º dia (3,25). Em contraste, a curva de sorologia IgM teve o maior valor mediano no 15º dia (3,37), depois uma queda contínua nas avaliações subsequentes. As avaliações cinéticas dos anticorpos IgG e IgM são mostradas nas Figuras 1 e 2 , respectivamente.

Figura 1 : Cinética de IgG do nucleocapsídeo anti-SARS-CoV-2 em cada ponto de tempo. A presença de anticorpos IgM e IgG específicos contra a proteína do nucleocapsídeo do SARS-CoV-2 foi avaliada usando um imunoensaio quimioluminescente de micropartículas (CMIA). Resultados > 1,4 são considerados positivos. 

Figura 2 : Cinética de IgM do nucleocapsídeo anti-SARS-CoV-2 em cada ponto de tempo. A presença de anticorpos IgM e IgG específicos contra a proteína do nucleocapsídeo de SARS-CoV-2 foi avaliada usando um imunoensaio quimioluminescente de micropartículas (CMIA), ensaio de anticorpos SARS-CoV-2 da Abbott (Abbott Laboratories, IL, EUA) pelo analisador de imunoensaio ARCHITECT i1000SR . Resultados > 1,0 são considerados positivos.*D15, D30, D45, D60, D90 e D180 indicam 15, 30, 45, 60, 90 e 180 dias após o início dos primeiros sintomas, respectivamente. 

De todos os participantes analisados, 26% não apresentaram valores reativos para IgG ou IgM em nenhuma avaliação. Dos 53 pacientes na avaliação de 180 dias, 72% eram não reativos e 28% e 26% tinham IgG e IgM reativos, respectivamente. Houve uma associação significativa entre dor de garganta e falta de ar e níveis reativos de IgG. Pacientes com dor de garganta e falta de ar tiveram 5,4 e 5,9 vezes mais chances de ter uma IgG reativa no dia 180, respectivamente, do que pacientes sem esse sintoma. ( Tabela 2 ).

DISCUSSÃO

Neste estudo, uma coorte de profissionais de saúde com COVID-19 leve foi avaliada para determinar a cinética de anticorpos e os fatores de risco clínicos durante a duração da resposta imune humoral durante a doença. Os sintomas mais comuns na fase aguda foram dores musculares, cefaléia, anosmia e ageusia. Após 30 dias, os principais sintomas foram fadiga, dores musculares, anosmia e ageusia. Da mesma forma, de acordo com um acompanhamento em pacientes com COVID-19 não crítico⁹ , anosmia foi a queixa mais frequente aos 30 e 60 dias após o início dos sintomas, e 50% apresentaram astenia após 30 dias. Astenia/fadiga persistente também foi relatada após 60 dias em mais da metade dos pacientes em uma coorte italiana¹⁰ , embora os pacientes não tenham sido classificados com base na gravidade da doença. Além disso, em um acompanhamento de seis meses em Wuhan, China¹¹ , fadiga ou fraqueza muscular (63%) e dificuldade para dormir (26%) estiveram entre as queixas mais frequentes em pacientes com COVID-19 leve e moderado avaliados aproximadamente 186 dias após o início dos sintomas.

Os resultados deste estudo sugerem que sintomas persistentes como fadiga ou astenia podem estar entre os sintomas mais prejudiciais, pois podem dificultar o retorno do paciente às atividades normais, como trabalho e exercícios físicos, impactando diretamente na qualidade de vida. Por outro lado, a anosmia tem sido mais discutida como um potencial fator de estresse¹² do que uma deficiência física. Mesmo antes da pandemia de COVID-19, foi demonstrada uma correlação entre mudanças de humor desencadeadas pela perda do olfato¹³ . No entanto, mais pesquisas são necessárias para elucidar as repercussões fisiológicas e psicológicas dessa condição.

A maioria dos profissionais de saúde deste estudo apresentou soroconversão para IgG; no entanto, 26% não apresentaram resposta humoral em nenhum momento. Estudos anteriores relataram níveis detectáveis de IgG de 95%¹⁴ and 92.6%¹⁵ em profissionais de saúde e casos leves a moderados, respectivamente. Sintomas mais leves e uso de métodos diferentes poderiam explicar as menores taxas de soroconversão observadas neste estudo.

Além disso, consistente com outros estudos sobre soroconversão¹⁶ , os níveis séricos de IgG e IgM atingiram picos em diferentes períodos. Nossos resultados mostraram que os valores de IgG variaram mais entre os pacientes, resultando em dados mais dispersos do que os valores de IgM. Estudos argumentaram que tempo de duração e quantidade de produção de anticorpos é um fenômeno comum que pode estar associado a fatores individuais, como comorbidades e idade¹⁷ . Nossos resultados mostraram que as medições de IgG atingiram o pico em 30 dias após o início dos sintomas e começaram a diminuir no dia 90, enquanto as medições de IgM começaram a diminuir a partir do dia 30, continuando até os dias 90 e 180. Da mesma forma, esse padrão também foi observado em um relatório de cinética de anticorpos em pacientes com COVID-19 leve a moderado, nos quais ocorreu uma leve diminuição nos títulos de anticorpos por volta de 90 dias¹⁸ . Isso corrobora a hipótese de que uma resposta imunológica mais robusta e apresentada durante a fase precoce da infecção está relacionada à uma apresentação mais branda da doença, resultando em maior controle do desenvolvimento da doença¹⁹ . Assim, considerando a correlação entre a gravidade dos sintomas e os níveis de IgG e IgM, também é possível associar esses padrões esperados com as apresentações sindrômicas observadas em pacientes em ambientes clínicos.

Em particular, observamos que dor de garganta e falta de ar foram fatores de risco independentes para uma maior duração da reatividade do anticorpo IgG, enquanto uma coorte prospectiva em uma população brasileira mostrou correlações semelhantes com maior frequência de pacientes com tosse¹⁵ . Tomados em conjunto, esses resultados sugerem que os sintomas respiratórios estão mais fortemente associados à resposta imune humoral no COVID-19.

Além disso, a avaliação da função pulmonar por meio da espirometria revelou padrões obstrutivos leves em cinco pacientes durante os primeiros 30 dias após o início dos sintomas, apresentando melhora após seis meses de acompanhamento, sem nenhum paciente apresentar padrão restritivo após o início dos sintomas sintomas pós-COVID-19 leve. Esses resultados foram consistentes com um estudo de 47 pacientes com infecção leve por COVID-19, no qual nenhum dos pacientes apresentou comprometimento pulmonar quatro meses após o início dos sintomas iniciais medidos por espirometria²⁰ . Isso indica que pode não haver comprometimento pulmonar persistente em pacientes com infecções leves a moderadas. No entanto, um estudo de acompanhamento de 4 meses mostrou que a capacidade de difusão da função pulmonar é comumente alterada no COVID-19, o que pode estar correlacionado com fadiga prolongada em pacientes²⁰ . Embora não tenhamos conseguido avaliar esse fator neste estudo, outros relatos sugeriram que prejuízos na capacidade de difusão e, conseqüentemente, redução na capacidade de realizar trocas gasosas, estão correlacionados com danos mediados pela resposta imune ao sistema microcirculatório do pulmão²¹ . Portanto, o comprometimento da função pulmonar devido a casos leves de COVID-19 não pode ser excluído. No entanto, os três pacientes de nossa amostra que apresentaram sintomas respiratórios persistentes que necessitaram de medicação apresentaram melhora espirométrica nos valores de VEF1 e VEF1/CVF, indicando melhor fluxo aéreo. Além disso, no dia 180, todos os pacientes com comprometimento da função pulmonar na primeira avaliação apresentaram melhora em seus testes de segunda espirometria.

CONCLUSÃO

Nossos achados mostraram que 26% dos pacientes não produziram uma resposta humoral pós-COVID-19 leve e que os títulos de anticorpos caíram significativamente após 90 dias. 28% manteve anticorpos IgG reativos após seis meses. Dor de garganta e falta de ar foram preditores de maior duração da resposta imune humoral. Além disso, uma melhora nos parâmetros espirométricos associados à resolução clínica dos sintomas indica uma melhora substancial do quadro do paciente após o estado inflamatório transitório, sem implicações de saúde a longo prazo.